A PCR (reação em cadeia da polimerase) é uma técnica fundamental usada na biologia molecular para amplificar sequências específicas de DNA para várias aplicações experimentais. Selecionando a direita Fabricantes de placas de PCR é crucial para a realização de experimentos bem -sucedidos. Este artigo tem como objetivo discutir as principais considerações que os pesquisadores devem ter em mente ao escolher uma placa de PCR.
1. Material da placa:
O material dos fabricantes de placas de PCR desempenha um papel significativo na manutenção da integridade da amostra e minimizando variações experimentais. Os tipos comuns de placas de PCR são feitos de polipropileno ou cloreto de polivinil (PVC). As placas de polipropileno são preferidas, pois são compatíveis com uma variedade de produtos químicos e são resistentes a solventes utilizados na PCR.
2. Forma e perfil da placa:
Os fabricantes de placas de PCR estão disponíveis em formas diferentes, como um formato padrão de 96 poços ou 384 poços. A escolha depende dos requisitos experimentais específicos e da taxa de transferência de amostra desejada. O perfil da placa, como plano, semi-esquiliado ou de esqui completo, afeta as propriedades de vedação e manuseio. As placas de escilha cheia proporcionam melhor estabilidade, enquanto as placas semi-esquiliadas permitem fácil recuperação de amostras.
3. Opções de vedação:
A vedação eficaz é crucial para evitar contaminação e evaporação durante a PCR. Uma placa de PCR pode vir com várias opções de vedação, como filmes adesivos, focas de calor ou tiras de tampa. Os pesquisadores devem selecionar o método de vedação que atenda às suas necessidades experimentais específicas. A vedação de calor é uma escolha melhor quando as experiências de armazenamento a longo prazo ou de alto rendimento são antecipadas.
4. Bem volume e forma:
As placas de PCR normalmente têm poços com uma faixa de volume de 20-200 μl. A seleção do volume do poço depende do volume de reação necessário e da disponibilidade de reagentes. Os poços em forma de V ou em forma de U podem melhorar a eficiência da recuperação da amostra e reduzir a chance de contaminação cruzada durante a pipetagem.
5. Condutividade térmica:
A condutividade térmica da placa de PCR desempenha um papel crucial na obtenção de distribuição uniforme de temperatura durante o processo de ciclagem térmica. As placas com alta condutividade térmica minimizam os diferenciais de temperatura, garantindo resultados precisos e reproduzíveis. Placas revestidas de alumínio ou alumínio geralmente são melhores escolhas
6. Transparência óptica:
Certas experiências de biologia molecular, como PCR quantitativa (qPCR) ou PCR em tempo real, requerem detecção óptica de sinais fluorescentes. Os fabricantes de placas de PCR opticamente transparentes com baixa autofluorescência são essenciais para obter dados de qualidade. As placas feitas de polímero de grau óptico ou polipropileno virgem são comumente usadas para essas aplicações.
7. Compatibilidade com instrumentos:
As placas de PCR precisam ser compatíveis com os ciclistas térmicos e outras instrumentação usadas no laboratório. Diferentes formatos de placa de PCR podem ter requisitos específicos para carregamento ou posicionamento de amostra no instrumento. Os pesquisadores devem garantir que a placa de PCR selecionada seja compatível com seus equipamentos para evitar desafios ou limitações técnicas.
8. Esterilidade e controle de qualidade:
As placas de PCR devem ser fabricadas e embaladas sob condições estéreis para minimizar o risco de contaminação. Medidas de controle de qualidade, como testes de qualidade específicos de lote, são essenciais para garantir resultados consistentemente confiáveis. Os pesquisadores devem verificar se o fornecedor de placas de PCR adere aos padrões de qualidade e fornece certificados de análise para cada lote.
9. Considerações de custo:
Ao considerar os principais atributos mencionados acima, os pesquisadores também devem avaliar a relação custo-benefício da placa de PCR. Diferentes fornecedores oferecem placas a preços variados, com custos adicionais para opções de vedação ou recursos específicos de placas. É essencial equilibrar as qualidades de placas desejadas com o orçamento disponível.
Conclusão:
A seleção da placa de PCR apropriada é crucial para o sucesso de experimentos de biologia molecular. Os pesquisadores devem considerar vários fatores, como material de placa, forma e perfil, opções de vedação, volume e forma de poço, condutividade térmica, transparência óptica, compatibilidade com instrumentos, esterilidade e controle de qualidade e considerações de custo. Ao fazer escolhas informadas, os cientistas podem otimizar seus experimentos de PCR e garantir resultados confiáveis e repro.